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紅細(xì)胞裂解液說(shuō)明書(shū)

更新時(shí)間:2016-06-16      瀏覽次數(shù):4274

紅細(xì)胞裂解液

Cat NO : NH4CL2009 規(guī)格 :100 mL

產(chǎn)品簡(jiǎn)介: 本裂解液有別于市場(chǎng)上銷(xiāo)售的其它紅細(xì)胞裂解液,其配方經(jīng)過(guò)本公司優(yōu)化在裂解紅細(xì)胞的同時(shí)不損傷并在一定程度上保護(hù)淋巴細(xì)胞(lymphocyte)或其它有細(xì)胞核的細(xì)胞,所獲得的細(xì)胞可保持完好的生物活性和完整的細(xì)胞形態(tài)。另外,本裂解液中無(wú)DNA及RNA酶,配合細(xì)胞分離液使用所提細(xì)胞可廣泛用于細(xì)胞培養(yǎng)及分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn),請(qǐng)廣大用戶從優(yōu)選擇。 紅細(xì)胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer),也稱ACK Lysis Buffer,是一種用于從人或鼠等的血液或組織細(xì)胞樣品中裂解并去除無(wú)細(xì)胞核紅細(xì)胞的溶液。 本裂解液不適用于有細(xì)胞核紅細(xì)胞的裂解,例如鳥(niǎo)或禽類(lèi)的紅細(xì)胞。本裂解液經(jīng)過(guò)無(wú)菌處理,處理過(guò)的血液或組織細(xì)胞樣品可以用于后續(xù)的原代培養(yǎng)、細(xì)胞融合以及核酸或蛋白的提取及各種常規(guī)的分析和檢測(cè)。 保存條件: 常溫避光保存,有效期一年。 注意事項(xiàng): 本裂解液為無(wú)菌產(chǎn)品,請(qǐng)注意保持無(wú)菌,使用本產(chǎn)品時(shí)宜在超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行。 如果經(jīng)過(guò)紅細(xì)胞裂解液處理后的樣品后續(xù)用于總RNA的提取,在處理細(xì)胞時(shí)不必使用經(jīng)過(guò)DEPC處理過(guò)的溶液。為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。 使用說(shuō)明: 裂解過(guò)程及離心需在4℃的條件下進(jìn)行。 對(duì)于細(xì)胞懸液樣品:
1. *次裂解,加入5-8倍細(xì)胞體積的紅細(xì)胞裂解液,輕輕吹打混勻,裂解2min。
2. 300g離心10min,棄紅色上清。
3. 如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不*,可以重復(fù)上述步驟1、2步進(jìn)行短時(shí)多次裂解。但后續(xù)每次加入的紅細(xì)胞裂解液為上一次的一半,但zui少不能低于2ml。裂解液減少到只剩余2ml時(shí),每次裂解結(jié)束,需先加入10ml PBS進(jìn)行終止,并300g離心10min,棄紅色上清。直至紅細(xì)胞裂解*,裂解結(jié)束。通常極微量的紅細(xì)胞不會(huì)影響后續(xù)的一些檢測(cè)。
4. 洗滌1-2次:加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液,重懸沉淀,300g離心5min,棄上清。洗滌液的用量通常應(yīng)至少為細(xì)胞沉淀體積的5倍。

5. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀后即可進(jìn)行計(jì)數(shù)等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
對(duì)于血液樣品:
1. 取新鮮抗凝血,400-500g離心5min,離心棄血漿。
2. *次裂解,加入5-8倍細(xì)胞體積的紅細(xì)胞裂解液,輕輕吹打混勻,裂解2min。
3. 300g離心10min,棄紅色上清,留沉淀。
4. 如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不*,可以重復(fù)上述步驟2、3步進(jìn)行短時(shí)多次裂解。但后續(xù)每次
加入的紅細(xì)胞裂解液為上一次的一半,但zui少不能低于2ml。裂解液減少到只剩余2ml時(shí),
每次裂解結(jié)束,需先加入10ml PBS進(jìn)行終止,并300g離心10min,棄紅色上清。直至紅
細(xì)胞裂解*,裂解結(jié)束。通常極微量的紅細(xì)胞不會(huì)影響后續(xù)的一些檢測(cè)。
5. 洗滌1-2次:加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液,重懸沉淀,300g離心5min,
棄上清。洗滌液的用量通常應(yīng)至少為細(xì)胞沉淀體積的5倍。
6. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀后即可進(jìn)行計(jì)數(shù)等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
注意:對(duì)于微量或少量的血液樣品,可以在*步中不進(jìn)行離心棄上清的操作,直接在第二
步中加入10倍血液體積的紅細(xì)胞裂解液,進(jìn)行裂解。對(duì)于鼠的血液,裂解時(shí)間稍短,對(duì)于人
的外周血,宜延長(zhǎng)裂解時(shí)間,具體裂解時(shí)間需客戶自行摸索,以達(dá)到*裂解效果。裂解過(guò)
程中宜適當(dāng)搖動(dòng)以促進(jìn)紅細(xì)胞裂解。

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