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人外周血淋巴細胞分離液在競爭中優勝劣汰

更新時間:2016-05-09      瀏覽次數:1371
    人外周血淋巴細胞分離液在競爭中優勝劣汰
    人外周血淋巴細胞分離液是帶有乳光或微乳光的無菌水溶液,人外周血淋巴細胞分離液主要成分是Ficoll400與泛影酸葡甲胺。
    人外周血淋巴細胞分離液適用于從血液中分離所需細胞,在醫療和醫學生物學中廣泛應用。本淋巴細胞分離液為無菌包裝,未啟封前置于10℃以下易出現白色結晶,影響分離效果。啟封后短期置4℃保存,分離過程應在18-25℃環境下進行。人外周血淋巴細胞分離液啟封后應置于4℃的保存條件下避免微生物污染,從冰箱中取出后不能立即使用,需待溶液溫度升至室溫,搖勻后使用。
    整個分離過程中,溫度應控制在18-28℃且在無菌環境下,避免微生物污染,否則會影響分離質量。人外周血淋巴細胞分離液取血采用摘眼球的方法zui多能取2-3ml,大部分只能取1.5ml左右;或者心臟穿刺的方法;另外,不知道你的小鼠是不是還需要繼續養著,如果不繼續養,可以采用提取小鼠脾臟淋巴細胞的方法。人外周血淋巴細胞分離液加樣后及時放人孵箱。標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。封板溫育時,各孔一定要封嚴,防止陽性標本的液體蒸發,產生周邊現象從而導致“花板”的出現。人外周血淋巴細胞分離液用洗板機洗板時,保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過程中易產生拖帶現象而導致“花板”的出現。
    用人外周血淋巴細胞分離液分離,稀釋血液只要是等滲的都可以,我們用過PBS生理鹽水都沒有問題。淋巴細胞培養的過程中,如要求培養1周以上,分離效果分離出來的淋巴細胞數量,培養濃度不宜過低能在1x106細胞/ml濃度及以上。人外周血淋巴細胞分離液試劑盒等試劑盒適用于科研實驗,禁用于臨床,嚴格按照人外周血淋巴細胞分離液試劑盒說明書進行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。人外周血淋巴細胞分離液合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長,加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用。
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