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人或各種動物外周血中性粒細胞分離液試劑盒分離方法說明及圖例

更新時間:2013-01-15      瀏覽次數:4465

 

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產品名稱 :
 大鼠外周血中性粒細胞分離液試劑盒
品牌 :
 TBD
貨號 :
 LZS1091
規格 :
 2X100ml/kit
詳細信息 :
 
分離方法說明及圖例
A. 取 1ml新鮮抗凝血與E液1:1混合再與1ml的全血及組織稀釋液(Cat#:2010C1119)混
勻置20℃-30℃下自然沉降20-30分鐘。吸取渾濁的上清部分,底部紅細胞(含大量中性
粒細胞)備用;
B. 將步驟A中所得的渾濁上清液體小心疊加在A液之液面上(上清液與A液的比例為1:1);
C. 以400g(約1500轉/分)離心15分鐘(半徑15cm水平轉子);
此時離心管中由上至下細胞分四層。*層;為稀釋液(血漿)層。第二層;為環狀
乳白色單個核細胞層。第三層;為混濁分離液層(此層液體中含有一定量中性粒細胞)。
第四層;極少量紅細胞層(含一定量中性粒細胞)。
D. 將步驟A及步驟C中所得紅細胞層用紅細胞裂解液裂解并去除紅細胞獲得大量中性粒細
胞(詳細方法請參看“二、紅細胞裂解液使用說明”)。
E. 收集步驟C中所得第三層混濁分離液及步驟D中所得大量中性粒細胞放入含細胞洗滌液
(Cat#:2010X1118)4-5ml的試管中,充分混勻后,以500g(約1800轉/分)離心20分鐘,
棄去上清留沉淀細胞重新懸起。重復洗滌2次即得所需中性粒細胞。

  

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